Пероксидаза хрону (HRP) є глікопротеїн 44 кДа з 6 залишками лізину, який можна кон'югувати з антитілами та білками для використання в різних цілях. Кон'югати антитіло-HRP зазвичай використовуються в ELISA, IHC та вестерн-блоттингу. Мітку ферменту можна візуалізувати за допомогою хромогенних реакцій. 21 травня 2023 р.
Що таке HRP-кон'юговані вторинні антитіла? Пероксидаза хрону (HRP) є зазвичай використовувана мітка ферменту з вторинними антитілами для посилення сигналу виявлених мішеней. HRP каталізує окислення субстратів у присутності перекису водню, результатом чого є або кольоровий осад, або світло.
ПХ використовується в імуногістохімії та ІФА т. к він генерує кольорові сполуки. Для виявлення молекули антигену або білка субстрати HRP розроблені таким чином, що вони генеруватимуть хемілюмінесцентний, хромогенний або флуоресцентний сигнал після окислення.
Кон'юговане первинне антитіло виявляє аналіт, пов'язаний з планшетом. Непрямий ІФА. Кілька кон'югованих вторинних антитіл здатні зв'язувати первинне антитіло, що призводить до посилення сигналу.
Після додавання субстрату ферментативної реакції, що містить пероксид і ТМВ, HRP каталізує окислення безбарвного ТМВ у блакитний ТМВ+. Синій TMB+ перетвориться на жовтий TMB2+ після додавання стоп-розчину, що містить соляну кислоту.
Пероксидаза хрону (HRP) — це глікопротеїн масою 44 кДа з 6 залишками лізину, який можна кон’югувати з антитілами та білками для використання в різних цілях. Кон'югати антитіло-HRP зазвичай використовуються в ELISA, IHC та вестерн-блоттингу. Мітку ферменту можна візуалізувати за допомогою хромогенних реакцій.
Кон'югати HRP можна використовувати для колориметричне виявлення. Кон'югований репортерний фермент каталізує перетворення хромогенного субстрату в кольоровий осад, який візуалізується безпосередньо на блоттинг-мембрані або зразку тканини.